Кинетика ферментативных реакций
Если принять концентрацию продукта в условия1 эксперимента (разбавленные растворы) равной е активности, то
Для определения начальной концентрации суб страта в растворе [S]0 необходимо знать связь ме жду [S]o и [Р]—концентрацией продукта у поверх ности электрода.
В случае второго способа — метод начальных ско ростей — измеряют величину:
dE Р.Т 1 d\P) dt F [P] dt
Если предположить, что в период предстационар ной кинетики (4—12 с от начала процесса) 1/[Р] из меняется медленнее, чем d[P]fdt, то:
dE_ d\P\ (d\S\ \
** dt A dt J[S14Sl
6.E
Построив калибровочную кривую -^^/[S]
можно получить значение [S]0 неизвестных рас¬творов.
В случае измерения стационарного ?ст отклика электрода (третий способ) строят зависимость
На рис. IV. 4 изображена типичная калибровочная кривая ферментного электрода, полученная по спо¬собу измерения стационарного отклика электрода, S-Образный вид этой кривой хорошо согласуется с теоретическими исследованиями зависимости между стационарным электродным потенциалом и началь¬ными концентрациями субстрата и иммобилизован¬ного фермента (с учетом диффузионных факторов).